Figura 23


Figura 23.- Ensayo genético para estudiar interacciones entre proteínas. El activador transcripcional GAL4 esta compuesto por dos dominios funcionales, un dominio amino terminal que se une al promotor de GAL1, y un dominio carboxilo que activa la transcripción. Con el fin de demostrar que este sistema se puede utilizar para identificar si ocurren interacciones entre dos proteínas, el segmento del gen que codifica el dominio de unión al ADN de GAL4 se fusionó con el gen SNF1 y el segmento de ADN que codifica para el dominio de activación se fusionó al gen SNF4. Se sabe que las proteínas SNF1 y SNF4 se asocian formando un complejo que tiene actividad de protein cinasa. Los dos genes fusionados se integraron en diferentes vectores y se introdujeron por transformación a una levadura portadora del gen lacZ de E. coli, que codifica para la b-galactosidasa y cuya expresión depende del promotor del gen GAL1. Las células que recibieron ambos genes se tiñeron de azul cuando se cultivaron en presencia de X-gal, un substrato incoloro que se tiñe de azul por acción de la b-galactosidasa. Las células control que recibieron un plásmido que sintetiza la proteína GAL4 tambien se tiñeron de azul. Estos resultados mostraron que se logró formar un factor transcricional funcional al asociarse las proteínas Snf1 y Snf4.






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