Figura 14.- Clonación de genes de levadura por complementación en E. coli. En este caso se prepara una biblioteca de ADN genómico de levadura, insertando fragmentos del mismo en un vector que sea capaz de replicarse en E. coli y que sea portador de un gen que confiera resistencia a algún antibiótico. Con esta biblioteca se transforma un cultivo de una mutante de E. coli afectada en el gen leuB y por tanto incapaz de sintetizar leucina. Despues de la transformación, las bacterias obtenidas se siembran en un medio carente de leucina. Aquellas células de E. coli que incorporaron un plásmido de la biblioteca portador del gen de levadura homologo a leuB serán capaces de crecer en ausencia del amino acido. A partir de cultivos de estas bacterias, será posible purificar el plásmido y recuperar el gen de la levadura. [ Regresar ] |
